Что такое эко и пэ. Экстракорпоральное оплодотворение и перенос эмбрионов

Дата: 30.06.2020

При недостаточном для проведения ИИСМ количестве сперматозоидов или при
отсутствии эффекта от ВМИ в течение нескольких циклов может быть проведено ЭКО, когда
сперматозоиды оплодотворяют ооцит вне организма — in vitro , или «в
пробирке».

Вначале метод ЭКО и ПЭ применялся преимущественно при бесплодии,
обусловленном непроходимостью маточных труб или их отсутствием. В таких случаях метод
предусматривает получение яйцеклеток из яичника женщины, оплодотворение их in vitro и перенос
эмбриона в полость матки после нескольких его дроблений в пробирке. Метод разработан Р. Эдвардсом и
П. Стептоу (Англия, 1978) и назван ими in vitro fertilization and miotransfer (IVF&ET).

Процедура ЭКО состоит из следующих этапов:

отбор и обследование пациентов;
индукция суперовуляции, включая мониторинг фолликулогенеза и развития эндометрия;
пункция фолликулов яичников;
инсеминация ооцитов и культивирование эмбрионов in vitro ;
перенос эмбрионов в полость матки;
поддержка лютеиновой фазы стимулированного менструального цикла; S диагностика беременности на
ранних сроках.

Последние 15 лет внимание специалистов, работающих в программе ЭКО и ПЭ, привлечено к
схемам стимуляции суперовуляции с использованием агонистов гонадотропего-рилизинг-гормона (а-ГнРГ),
которые представляют собой группу синтетических соединений, сходных с естественным ГнРГ.

В соответствии с двухфазностью действия а-ГнРГ в программе ЭКО и ПЭ используют две
принципиальные схемы стимуляции суперовуляции.

При так называемой «короткой» схеме введение а-ГнРГ и ЧМГ (ФСГ) начинают в ранней
фоллику-линовой фазе одновременно или ЧМГ (ФСГ) назначают через 2—3 дня после первого введения а-ГнРГ
— в фазу активации аденогипофиза. Блокада функциональной активности аденогипофиза возникает уже
после начала стимуляции суперовуляции. Так, декапептил в ежедневной дозе 0,1 мг вводят подкожно со
второго дня менструального цикла до назначения овуляторной дозы ХГ. Стимуляцию суперовуляции ЧМГ
начинают с пятого дня менструального цикла с 2—3 ампул ЧМГ (75 ME— 225 ME) и проводят с соблюдением
критериев УЗИ и гормонального мониторинга до дня введения ХГ.

При использовании длинной схемы, считающейся «золотым стандартом», введение
а-ГнРГ начинают в ранней фолликулиновой или в середине лютеиновой фазы цикла, предшествующего
стимуляции суперовуляции. Могут применяться а-ГнРГ как для ежедневного введения, так и депонированные
формы. Большинство клиницистов предпочитают ежедневные подкожные инъекции а-ГнРГ, так как они
более экономичны, имеют высокую клиническую эффективность и хорошо переносятся.

Сейчас чаще всего для достижения блокады функциональной активности аденогипофиза
используют декапептил или диферелин для ежедневного подкожного введения в дозе 0,1 мг и
депо-дека-пептил для внутримышечного введения в дозе 3,75 мг, а в качестве стимулятора суперовуляции
— препараты ЧМГ и рекомбинантный ФСГ.

Через 10—17 дней от первого введения а-ГнРГ в результате снижения рецепторов ГнРГ в
клетках аденогипофиза (десенситизация) уровень гонадо-тропинов в плазме крови снижается до базального
(соответственно происходит блокада гонад) и прекращается спонтанное развитие фолликулов в
яичниках.

Стимуляцию препаратами ЧМГ (ФСГ) начинают только после достижения блокады
секреторной активности аденогипофиза и вторично — яичников.

Критерии начала стимуляции суперовуляции в «длинных» схемах с использованием
а-ГнРГ и ЧМГ (ФСГ):

снижение концентрации Е 2 в плазме крови до 30—50% от исходного уровня (менее 100 пмол/л или 30
пг/мл);
толщина эндометрия не более 5 мм.

Стимуляцию суперовуляции в схемах с использованием а-ГнРГ следует
проводить с обязательным использованием УЗИ и гормонального мониторинга независимо от формы введения
препарата и фазы менструального цикла, в которой оно начато.

Ежедневную дозу ЧМГ (ФСГ) в первые пять дней стимуляции определяют с учетом количества
фолликулов, полученных при предшествующих попытках ЭКО и ПЭ, и, как правило, она не превышает 2-3
ампул ЧМГ (ФСГ) (150 ME- 225 ME) в день до дня введения овуляторной дозы ХГ.

Определение времени введения овуляторной дозы ХГ — также один из ключевых моментов
проведения программы ЭКО и ПЭ. Овуляторная доза ХГ назначается после достижения уровня Е 2 в
плазме крови не менее 1000 пмол/л (300 пг/мл) из расчета на каждый лидирующий фолликул, при размерах
лидирующих фолликулов 18—20 мм и толщине эндометрия не менее 9 мм. При наличии в одном или обоих яичниках
1—5 фолликулов овуляторная доза ХГ составляет обычно 5 тыс. MEХГ, если имеется более 10 фолликулов
— 10 тыс. MEХГ. В каждом случае овуляторная доза ХГ определяется индивидуально.

При рассмотрении схем стимуляции суперовуляции нельзя и не упомянуть об антагонистах
ГнРГ. Использование антагонистов ГнРГ в схемах стимуляции суперовуляции в программе ЭКО и ПЭ имеет ряд
преимуществ перед применением а-ГнРГ: блокада гонадотропной активности аденогипофиза возникает в
течение нескольких часов, без предшествующей фазы активации; возможно не только предотвращение, но и
прекращение уже начавшегося «паразитарного» пика ЛГ в период стимуляции; требуется
меньшее количество препаратов ЧМГ, ФСГ и их комбинаций; реже возникает СГЯ; почти вдвое сокращается
продолжительность лечения.

Антагонисты назначают по 0,25 мг или по 3,0 мг подкожно на 6—7-й день стимуляции
суперовуляции или при диаметре лидирующего фолликула 14 мм в течение 4—5 дней.

Назначение овуляторной дозы ХГ осуществляется по описанным выше критериям, доза
подбирается индивидуально. Через 35—36 часов производится трансвагинальная пункция фолликулов в
целях аспирации фолликулярной жидкости и получения преовуляторных ооцитов.

Метод культивирования преовуляторных ооцитов состоит из нескольких этапов.

Забор ооцитов. Полученную фолликулярную жидкость эмбриолог анализирует на
предмет поиска ооцитов на стереомикроскопе. Найденные ооциты последовательно промывают в среде для
промывки ооцитов и помещают в С0 2 -инкубатор в среде для культивирования.
Подготовка сперматозоидов. Из полученной спермы выделяют фракцию наиболее
подвижных сперматозоидов путем центрифугирования в градиенте плотности либо методом свободного
всплытия.

Оплодотворение. В случае ЭКО: ооциты переносят в среду
оплодотворения, содержащую предварительно выделенные наиболее подвижные сперматозоиды, и
помещают в С0 2 -инкубатор. В случае ИКСИ: ооциты очищаются от кумулисных клеток и инъектируются
сперматозоидами.

Оценка оплодотворения. Культивирование. Через 16—18 часов с момента
оплодотворения ооциты оценивают на предмет выявления признаков нормального оплодотворения. Аномально
оплодотворенные ооциты уничтожают, нормально оплодотворенные — переносят в среду
культивирования и помещают в С0 2 -инкубатор, где инкубируют до переноса в полость матки. Среды
культивирования меняют согласно протоколу культивирования, принятому лабораторией.
Перенос эмбрионов. Перенос эмбрионов осуществляется на третьи либо пятые
сутки культивирования (считая оценку оплодотворения — первыми сутками культивирования). Для
переноса эмбрионы в среде для переноса помещают в катетер, который передают гинекологу.

Эмбрионы, полученные после оплодотворения ооцитов одной и той же пациентки, как правило,
отличаются по скорости дробления и морфологическим параметрам. Качество дробления эмбрионов
оценивается по количеству и размеру бластомеров, по наличию и количеству фрагментации.

Качество эмбрионов, достигших стадии развития бластоцисты, оценивается по количеству и
размеру клеток трофектодермы, по наличию и качеству внутриклеточной массы, по объему полости и толщине
зоны пелюцида.

Количество переносимых эмбрионов, как правило, составляет не более двух, поскольку при
увеличении числа эмбрионов увеличивается риск моногоплодной беременности, что влечет за собой серьезные
проблемы акушерского и социального характера.

Возможные осложнения после ЭКО те же, что и после ВМИ, плюс возможность наружного и
внутреннего кровотечения.

Программа ЭКО — эффективный метод восстановления фертильности у пар с
мужским фактором бесплодия при получении от 500 тыс. до 1 млн быстроподвижных сперматозоидов и более 5% их
морфологически нормальных форм после обработки спермы в градиенте плотности. При этом показатель
оплодотворения ооцитов — в среднем 70—80%, беременностей на стимулированный цикл — около 30%,
родов — около 20% (табл. 26).

Доказаны следующие противопоказания к использованию метода ЭКО и ПЭ:

Абсолютные:

- злокачественные новообразования любой локализации, в том числе в анамнезе.

Относительные:

- соматические и психические заболевания, являющиеся противопоказаниями для вынашивания
беременности и родов; опухоли яичников;
- доброкачественные опухоли матки, требующие оперативного лечения;
- острые воспалительные заболевания любой локализации.

В.К. Чайка, В.В. Луцик, И.К. Акимова, М.В. Попова
Донецкий региональный центр охраны материнства и детства

Жіночий лікар №3 2007, стр.13

Вступление

Бесплодие - одна из самих актуальных проблем современной гинекологии. Несмотря на существенный прогресс в лечении бесплодия, не отмечается тенденция к снижению его частоты .

Проблема охраны репродуктивного здоровья населения Украины в настоящее время приобрела особую социальную значимость. Важным фактором, снижающим репродуктивный потенциал населения страны, является бесплодие в браке у 25% супружеских пар . У большинства женщин оно обусловлено непроходимостью маточных труб или их отсутствием. Все большее распространение при лечении бесплодия получает метод экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов в полость матки (ЭКО и ПЭ) . Эффективность ЭКО равна или превышает таковую в естественных условиях и составляет 35%.

Согласно приказу МОЗ Украины от 29.11.2004 г. № 579 "Про затвердження Порядку направлення жінок для проведення першого курсу лікування безплідності методами допоміжних репродуктивних технологій за абсолютними показаннями за бюджетні кошти", отделение диагностики и лечения бесплодного брака (ОДЛББ) Донецкого регионального центра охраны материнства и детства (ДРЦОМД) является базой для проведения одной попытки лечения бесплодия у женщин методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) по абсолютным показаниям за бюджетные средства.

Первый курс лечения бесплодия методами ВРТ проводится женщинам в возрасте 19-40 лет. Абсолютными показаниями для лечения являются: 1) нормогонадотропное бесплодие трубного происхождения: отсутствие или полная непроходимость обеих маточных труб; 2) суррогатное материнство при условии вынашивания беременности кровной родней: сестрой или матерью больной, у которой бесплодие маточного происхождения, связанное с отсутствием матки, аномалиями развития матки, синехиями в полости матки.

Все пациентки с бесплодием были обследованы по месту жительства согласно предписанию МЗО Украины от 11.10.2005 г. № 4.40-1004. Обследование женщин включало в себя: 1) группа, резус крови; 2) общий анализ крови; 3) общий анализ мочи; 4) коагулограмма; 5) биохимия крови; 6) анализ выделений из влагалища; 7) цитологическое исследование из шейки матки; 8) анализ на TORCH-инфекции; 9) RW; 10) ВИЧ; 11) антитела к вирусу гепатита В; 12) антиген к вирусу гепатита С; 13) гормональное обследование: ЛГ, ФСГ, эстрадиол на 2-3 день менструального цикла, тестостерон, пролактин, кортизол; 14) генетическое обследование; 15) осмотр специалистов (эндокринолог, психиатр, терапевт, инфекционист). Обследование мужчин: 1) генетическое обследование; 2) спермограмма; 3) RW; 4) ВИЧ.

Несмотря на большой перечень обследований и тщательный отбор, предусмотренные приказом № 579, пациенты нередко прибывают для лечения неподготовленными и недообследованными. В частности, с полипами шейки матки и полипами эндометрия, кистами яичника, гидро- и сактосальпинксами, повышенным уровнем тестостерона, кортизола. Эти пациенты требуют проведения подготовительного лечения, включающего гормональную терапию, иногда оперативного лечения.

За 2006 год нами проведено 345 циклов стимуляции суперовуляции с последующей пункцией фолликулов и переноса эмбрионов. Возрастной состав женщин выглядит следующим образом: 19-25 лет - 78 (22,6%); 26-30 лет - 114 (33,0%); 31-35 лет - 124 (36,0%); 36-40 лет - 29 (8,4%). Средний возраст пациенток составил 31,3 года, длительность бесплодия - в среднем 7,6 года.

Лечение получили женщины различных регионов Украины представленные в таблице 1.

Таблица 1. Количество пролеченных больных с бесплодием методами ВРТ по государственной программе за 2006 год по областям Украины

№ п/п	Область	Количество пациентов
№ п/п	Область	n	%
1.	АР Крым	28	8,1
2.	Днепропетровская	20	5,7
3.	Донецкая	160	46,3
4.	Запорожская	41	11,8
5.	Луганская	18	5,2
6.	Николаевская	13	3,8
7.	Одесская	7	2,0
8.	Полтавская	17	4,8
9.	Сумская	7	2,0
10.	Харьковская	12	3,5
11.	Херсонская	13	3,8
12.	Черкасская	4	1,6
13.	г. Севастополь	5	1,4
Всего		345	100

Всем пациенткам проводили стимуляцию суперовуляции на фоне применения агонистов гонадотропин-релизинг гормона (ГнРГ) по длинному протоколу. Для десенситизации (18-22 день менструального цикла) применялся препарат диферелин 3,75 мг. Стимуляция суперовуляции проводилась препаратом Пурегон 50 МЕ, активным веществом которого является фолитропин-бета (рекомбинантный фолликулостимулирующий гормон, ФСГ). Число ампул, рекомендуемое МОЗ Украины на цикл стимуляции - 40.

На сегодняшний день, основным и единственным показанием для включения пациентов в программу ЭКО с ПЭ за бюджетные средства, является отсутствие или непроходимость маточных труб. Если речь идет только о трубном бесплодии, то такой набор медикаментов может быть и обоснован. Однако, эндокринный фактор бесплодия, в большей или меньшей степени, присутствует практически у каждой больной.

Кроме этого, целому ряду пациенток в возрасте после 30 лет, с оперированными яичниками, "плохим ответчикам", не подходит длинный протокол стимуляции. Им предпочтительней использовать короткий протокол, для которого необходимы агонисты релизинг-гормонов короткого действия, а их нет.

Нами проводился ультразвуковой и гормональный мониторинг зреющих фолликулов. При достижении доминантными фолликулами размеров 18-20 мм вводилась овуляторная доза хорионического гонадотропина (ХГ). В данном случае внутримышечно вводился препарат Прегнил 10 ТЕ. С помощью трансвагинальной пункции аспирировали фолликулы. Культивирование ооцитов проводили по стандартной методике в среде Menezo В2.

Основные показатели стимуляции суперовуляции у женщин с абсолютными показаниями представлены в таблице 2.

Таблица 2. Основные показатели стимуляции суперовуляции

№ п/п	Показатели (средние)
1.	Число циклов стимуляции суперовуляции	98
2.	Возраст женщин, годы	30,5
3.	Длительность цикла, дни	29,1
4.	Число ампул Пурегона 50 МЕ	46
5.	Число дней стимуляции	10,2
6.	Число аспирированных фолликулов	8,7
7.	Размеры доминантных фолликулов, мм	19,2
8.	Толщина эндометрия в день введения ХГ, мм	10,9

Перенос эмбрионов проводили на 2-3 сутки после пункции. В полость матки пациентки переносили не более 3 нормальных эмбрионов. Поддержку лютеиновой фазы проводили по стандартной схеме с использованием прогестерона, утрожестана или дуфастона.

При неадекватной стимуляции суперовуляции и вследствие различной чувствительности рецепторного аппарата яичников к вводимым препаратам, а следовательно, и различной реакции яичников, увеличивается риск развития серьезного осложнения - синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) .

В литературе встречаются различные данные о частоте СГЯ, что обусловлено применением различных схем стимуляции суперовуляции и различных методов диагностики и профилактики этого осложнения . В среднем, по данным литературы, частота СГЯ колеблется в пределах от 8 до 23%. СГЯ средней степени составляет 1-7%, тяжелой - 1-1,8% на стимулированный цикл .

У 51 (14,8%) пролеченных нами женщин развился СГЯ. Из них: у 30 (8,7%) СГЯ легкой степени и у 21 (6,1%) СГЯ средней степени.

У женщин с легкой формой СГЯ уровень эстрадиола в среднем составлял 2050 pg/mL. При ультразвуковом исследовании диагностированы увеличенные до 6,0 см в диаметре яичники.

При средней степени СГЯ уровень эстрадиола в среднем составлял 4250 pg/m; яичники были увеличены до 6-10 см в диаметре; увеличение и напряжение живота, явные признаки асцита при ультразвуковом исследовании.
Лечение легкой степени СГЯ проводилось амбулаторно с применением малых объемов гипотонических жидкостей, таких как вода, сок и других легких напитков, а также трансфузии 6% рефортана 500,0 мл 1-2 раза.

Лечение СГЯ средней степени проводилось стационарно в гинекологическом отделении № 1 и отделении интенсивной терапии и реанимации ДРЦОМД. С целью восполнения ОЦК, возврата жидкости обратно в сосудистое русло, пациенткам вводились кристаллоидные растворы (физиологический раствор, раствор Рингера); коллоидные растворы (альбумин, гидроксиэтил крахмал); антигистаминные препараты; антикоагулянты. Одной пациентке был проведен сеанс плазмафереза. Пациенткам со средней степенью СГЯ была выполнена пункция брюшной полости, постановка катетера с целью выведения жидкости. После проведенного лечения мы наблюдали значительное клиническое улучшение, улучшение кровообращения и перфузии почек.

Первичную биохимическую диагностику беременности осуществляли на 14-й день после переноса эмбрионов путем определения концентрации ХГ в сыворотке крови. Последующую диагностику беременности (клиническую) проводили с помощью ультразвукового исследования на 21-й день после переноса эмбрионов. Ультразвуковое исследование сердцебиения плода, как правило, осуществляли при сроке беременности 4-5 недель.

Таблица 3. Эффективность лечения методом ЭКО и ПЭ

	2005р.		2006р.
Начато циклов лечения методом ЭКО и ПЭ	0		399
Закончено циклов лечения методом ЭКО и ПЭ	0		345
Снято с программы лечения методом ЭКО и ПЭ	0		0
Количество беременностей	0	0%	126	36,5%
Количество рожденных детей	0	0%	20	15,9%
Эффективность лечения методом ЭКО и ПЭ	0%		36,5%

Таким образом, эффективность лечения у 345 пациенток с трубной и трубно-перитонеальной формами бесплодия методом ЭКО и ПЭ составила 36,5% (126 женщин). В 2006 году уже родилось 20 (15,9%) детей.

Выводы
В ДРЦОМД согласно приказу № 579 МОЗ Украины проведено 345 циклов ЭКО и ПЭ. По возрасту пациентки распределились следующим образом: 19-25 лет - 78 (22,6%); 26-30 лет - 114 (33,0%); 31-35 лет - 124 (36,0%); 36-40 лет - 29 (8,4%). Средний возраст пациенток составил 31,3 года, длительность бесплодия - в среднем 7,6 года. По регионам данный вид лечения получили: АР Крым - 28 человек (8,1%); Днепропетровская область - 20 (5,7%); Донецкая область - 160 (46,3%); Запорожская область - 41 (11,8%); Луганская область - 18 (5,2%); Николаевская область - 13 (3,8%); Одесская область - 7 (2,0%); Полтавская область - 17 (4,8%); Сумская область - 7 (2,0%); Харьковская область - 12 (3,5%); Херсонская область - 13 (3,8%); Черкасская область - 4 (1,6%); г. Севастополь - 5 (1,4%). У 51 (14,8%) пролеченных нами женщин развился СГЯ. Из них: у 30 (8,7%) СГЯ легкой степени и у 21 (6,1%) СГЯ средней степени. Эффективность лечения бесплодия методом ЭКО и ПЭ составила 36,5% (126 женщин). В 2006 году уже родилось 20 (15,9%) детей.

Литература
1. Гордеева В.Л., Назаренко Т.А., Бурлев В.А., Сотникова Е.А. Синдром гиперстимуляции яичников // Проблемы репродуктологии. - 1998. - № 3. - С. 3-5.
2. Іванюта Л.І. Проблеми неплідності, причини, діагностика, лікування, та шляхи її вирішення // Збірник наукових праць Асоціації акушерів-гінекологів України. - К.: "Фенікс", 2001. - С. 292-295.
3. Іванюта Л.І. Репродуктивне здоров"я і неплідність // Мистетцтво лікування. - 2004. - №4. - С. 26-30.
4. Калинина Е.А. Синдром гиперстимуляции яичников при экстракорпоральном оплодотворении и переносе эмбрионов // Проблемы репродуктологии. - 1997. - № 1. - С. 51-74.
5. Квашенко В.П., Демина Т.Н., Адамова Г.М. Проблема сохранения репродуктивного здоровья женщины - основная цель работы служб планирования семьи // Материнство - величайший подвиг. Сб. статей - Донецк: ООО "Альматео", 2003. - С. 92-104.
6. Kulakov V., Leonov B., Lukin V., Kalinina E.A. Worid Congress on Fertility and Sterility, 14-th: Abstracts. - Caracas, 1992. - P. 331.
7. Леонов Б.В., Кулаков В.И. Состояние проблемы экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов // Проблемы репродуктологии. - 1998. - № 4. - С. 4-5.
8. Леонов Б.В., Кулаков В.И., Финогенова Е.Я. Использование препарата рекомбинантного ФСГ при лечении бесплодия в программе ЭКО и ПЭ // Проблемы репродуктологии. - 2001. - № 4. - С. 35-40.
9. Lunenfeld B. Worid Congress on Human Reproduction, 8-th. - Helsinki, 1990. - Abstr. 496.
10. Организация системы оказания специализированной помощи бесплодным супружеским парам в Украине / В.К.Чайка, И.К.Акимова, М.В.Попова и др. // Современные направления амбулаторной помощи в акушерстве и гинекологии. - Донецк: ООО "Лебедь", 2003. -
С. 108-119.
11. Schenker J.G. Синдром гиперстимуляции яичников // Проблемы репродуктологии. - 1997. - № 1. - С. 51-74.

Эмбриология

Эмбриология – наука о жизни до рождения.

Первые сведения о развитии зародыша человека в Древней Индии, Древней Греции

в VIII – VI в. до н.э.

Гиппократ «О семимесячном плоде», «О сверхоплодотворении»,

«О природе ребенка»

Леонардо да Винчи – один из основателей эмбриологии, как точной науки.

«Вены ребенка развиваются не в веществе матки его матери, но в плаценте, которая служит как бы сорочкой, одевающей матку изнутри и связана с ней с помощью ворсинок»

Петр I издал указы, предписывающие нежизнеспособных уродов птиц, зверей и человека сдавать в аптеки или коменданту города.

В 1718 г. возникла коллекция Кунсткамеры.

Карл Рейхерт в 1873 году впервые описал зародыш человека в очень раннем возрасте 12 – 13 дней и сделал зарисовки.

Прогенез.

Яйцеклетка, строение, классификация. Яйцеклетка женщины, трубный период развития.

· Ядро, ядрышко. Гаплоидный набор хромосом.

· Цитоплазма, органеллы, много РНК, отсутствует клеточный центр.

· Включения желтка – фосфо- и липопротеины.

· Кортикальные гранулы – производное комплекса Гольджи.

· Мультивезикулярные тельца – производные лизосом.

Типы яйцеклеток

· Алецитальные – не содержит желтка, окружены желточными клетками (беспозвоночные, например, плоские черви).

· Изолецитальные (гр.iso – ровно, однородно), олиголецитальные – желтка мало, равномерно в цитоплазме.

§ а) первично изолецитальные (хордовые, например ланцетник).

§ б) вторично изолецитальные (млекопитающие).

· Телолецитальные (telos – конец), полилецитальные – желтка много, у одного конца (вегетативного полюса), у другого анимального полюса – ядро и органеллы.

§ Умеренно телолецитальные (амфибии).

§ Резко телолецитальные (костистые рыбы, пресмыкающиеся, птицы).

· Центролецитальные – желток в центре клетки вокруг ядра (насекомые).

Яйцеклетка женщины – вторично изолецитальная.

Диаметр 120-130 мкм.

Две дополнительные оболочки:

§ zona pellucida – блестящая оболочка (гликопротеид Zp3 – рецептор для сперматозоидов);

§ corona radiatа – лучистый венец.

Трубный период развития. (около 5 суток)

После овуляции овоцит II порядка захватывают фибрии маточной трубы. В трубе происходит:

Второе деление мейоза и образование из овоцита II порядка яйцеклетки;

Оплодотворение;

Дробление.

Важнейшую роль играет слизистый секрет маточных труб.

Яйцеклетка способна к оплодотворению в течение 1-х суток, жизнеспособна – 2 суток.

Строение сперматозоида, концентрация, подвижность, изменения в женских половых путях.

Описал А. Левенгук в 1677 г.

Длина у человека около 70 мкм.

Две части:

· Головка;

Головка.

· Ядро с гаплоидным набором хромосом, очень плотно упакованных.

· Ядерные белки не гистоны, а богатые аргинином и цистеином – за счет них плотная упаковка.

· В конденсированном состоянии генетический материал защищен от повреждений.

· Акросома – спереди от ядра уплощенный пузырек, производное комплекса Гольджи. Содержит ферменты, необходимые для проникновения сперматозоида в яйцеклетку.

В хвосте 4 части.

· I - шейка

· II – промежуточная

· III - основная

· IV – концевая часть.

Шейка содержит 2 центриоли.

· От проксимальной центриоли отходит аксонема, которая имеет строение реснички

· Дистальная центриоль кольцевидной формы

Промежуточная часть.

· Митохондрии, расположенные по спирали

· Вокруг аксонемы

Основная часть.

· Аксонема.

· Вокруг волокнистая оболочка (тонкофибрильное влагалище).

Концевая часть.

· Аксонема.

· Покрыта непосредственно плазмолеммой.

ü Концентрация сперматозоидов в норме 20-200млн в мл спермы

ü Меньше – олигоспермия, мужское бесплодие.

ü 15% супружеских пар страдают бесплодием

ü 50% - мужское бесплодие!

Подвижность сперматозоидов в среднем 83%.

Приобретают подвижность в семявыносящих путях

Сеть семенника – 0,3 – 0,6%

Головка придатка – 7%

Хвост – 40%

ü Важнейшее значение играет секрет простаты – «второе сердце мужчины»

· Скорость движения сперматозоида – 2-3 мм/мин

· Путь до яичника 30 см преодолевает за 1,5 – 2 часа.

· Подвижность сохраняет до 5 сут., к оплодотворению способны 2 сут.

В кислой среде влагалища сперматозоид погибает через 2,5 часа.

В маточных трубах оптимальная среда:

· Капацитация (активизация) – увеличение подвижности, потребление кислорода, изменения в цитолемме.

· Фагоцитоз неполноценных сперматозоидов, в норме до 10-50 %.

Эмбриогенез человека занимает 10 лунных (28 дней) или 9 календарных месяцев.

Периоды эмбриогенеза.

· Начальный – 1-ая неделя; оплодотворение, дробление.

· Зародышевый – 2-8 неделя; гаструляция и закладка осевых зачатков органов – 2-3 неделя;

гисто – органогенез – 4-8 неделя.

· Плодный – с 3-го месяца до рождения.

Оплодотворение.

Слияние мужской и женской половых клеток с образованием одноклеточного организма – зиготы.

3 фазы:

· Сближение и дистантное взаимодействие.

o Пассивное движение яйцеклетки с током жидкости по яйцеводу.

o Активное движение сперматозоидов.

§ Отрицательный реотаксис – против тока жидкости.

§ Хемотаксис – по градиенту концентрации гиногамонов, выделяемых яйцеклеткой.

§ Электротаксис – электрическое взаимодействие между гаметами.

· Контактное взаимодействие гамет.

o Связывание гамет – множество сперматозоидов связывается с зернистой оболочкой яйцеклетки.

o Акросомная реакция – активизация ферментов акросомы, удаление фолликулярных клеток (денуация).

o Прикрепление к плазмолемме – один сперматозоид преодолевает оболочки, прикрепляется к плазмолемме. Выпячивание цитоплазмы – бугорок оплодотворения.

· Проникновение сперматозоида в яйцеклетку

o Головка и шейка (ядро и центриоли) одного сперматозоида проникают в яйцеклетку (моноспермия).

o Кортикальная реакция – кортикальные гранулы опорожняются в пространство между плазмолеммой и блестящей оболочкой.

o Блестящая оболочка уплотняется, образует оболочку оплодотворения, не пропускающая другие сперматозоиды.

o Сближение ядер – стадия двух пронуклеосов (12 часов).

o Слияние ядер – образование синкариона.

o Сразу начинается первое деление («материнская звезда» в метафазе).

Дробление.

· Ряд митотических делений без последующего увеличений дочерних клеток (бластомеров) до массы материнских. В интерфазе отсутствует G1-период.

· В результате дробление образуется бластула.

· Тип дробления зависит от количества и распределения желтка.

Ланцетник (яйцеклетка первичная изолецитальная).

· Дробление полное, равномерное, синхронное.

· Образуется целобластула.

Амфибии (яйцеклетка умеренно телолецитальная).

· Дробление полное, неравномерное, асинхронное.

· Амфибластула.

Птицы (яйцеклетка резко телолецитальная).

· Дробление неполное.

· Дискобластула.

Человек (яйцеклетка вторично изолецитальная).

· Дробление полное, асинхронное.

· Стадии 2,3,4,5,6,8,9,12,16 до 107 бластомеров.

· Неравномерное, неравноценное.

Два типа бластомеров.

· В центре – крупные темные бластомеры образуют эмбриобласт (зародыш).

· Снаружи – мелкие светлые образуют трофобласт (гр. trophe – пища).

ü Вначале зародыш имеет вид тутовой ягоды – морула

ü Затем появляется полость с жидкостью – бластоциста

ü На 5 сутки ХЭТЧИНГ – выклев бластоциста выходит из zona pellucida, попадает в матку.

Близнецы.

ü Первые бластомеры могут давать самостоятельные организмы (8 бластомеров) – однояйцевые близнецы.

ü Оплодотворение нескольких яйцеклеток – разнояйцевые близнецы.

«Погасите свечу, они выходят на свет»!!!

ü В 1755г. крестьянин села Введенского Яков Кириллов 60 лет был представлен ко двору. Первая жена родила 57 детей (4х4 + 7х3 + 10х2), вторая – 15 детей (1х3 + 6х2). Всего 72 ребенка.

ü 1782г. 27 февраля была прислана ведомость в Москву он Никольского монастыря Шуйского уезда. Федор Васильев 75 лет женатый 2 раза имел 87 детей.

Закономерность.

ü На 87 обычных родов – одна двойня.

ü На 87 двоен – одна тройня.

Имплантация (Нидация).

· Внедрение зародыша в эндометрий

· Начинается на 7 сутки, длится 40 часов

· 1 стадия. Адгезия (прилипание) – с помощью трофобласта зародыш прикрепляется к эндометрию.

· 2 стадия. Инвазия (проникновение).

o Трофобласт диффиринцируется на 2 слоя.

§ Цитотрофобласт.

§ Симластотрофобласт.

Симпластотрофобласт выделяет ферменты, разрушающие эндометрий.

Зародыш погружается в толщу эндометрия, дефект регенерирует.

Питание зародыша.

o В начале гистеотрофный тип – за счёт разрушенных тканей эндометрия;

o Затем гематотрофный тип – за счёт материнской крови.

Эмбриологические аспекты экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона (ЭКО и ПЭ).

Около 15 % супружеских пар бесплодны.

Мужское и женское бесплодие 50:50 %.

· Метод разработали англичанине: эмбриолог Роберт Эдвардс и гинеколог Патрик Стептоу.

· Первый «пробирочный» ребёнок родился в Англии в 1978 году - (в России в 1986 году).

· В 1907 году русский исследователь Груздев В.С. проводил опыты на кроликах. Забирал из яичников яйцеклетки, смешивая их со сперматозоидами, и вводил в яйцеводы.

Показания для ЭКО.

· Абсолютное женское бесплодие: полная непроходимость или отсутствие маточных труб.

Этапы ЭКО.

· Исключение мужского фактора бесплодия.

· Обследование женщины.

o Гормональный статус (ФСГ, ЛГ, пролактин, тестостерон, эстродиол и др.).

o Инфекции, передаваемые половым путём.

o Ультразвуковое исследование.

o Томография головного мозга (гипофиз).

o Лапороскопия и гистероскопия (наиболее информативные методы).

· Стимуляция суперовуляции.

o Стимуляция фолликулогенеза препаратами ФСГ.

o Введение в средине цикла овуляторной дозы хорионического гонадотропина (ХГ) - аналога лютеотропного гормона (ЛГ).

· Трансвагинальная пункция и аспирация овоцитов (8-10 овоцитов) через 36 часов после введения овоцитов ХГ.

· Перенос овоцитов в культуральную среду. Оценка качества овоцитов под микроскопом (критерии степени зрелости: наличие одного полярного тельца, состояние cumulus, corona radiata и др.) .

· Отбор зрелых овоцитов.

· Обработка спермы, градиентное центрифугирование с целью отбора фракции наиболее фертильных (активных) сперматозоидов.

· Оплодотворение.

o Добавление в культаральную среду спермы, не менее 50 тыс. подвижных сперматозоидов на 1 овоцит.

o Оптимально через 4 часа после появления одного полярного тельца.

· Культивирование в среде 2 суток (общепринято)

o Дробление: от 2-4 до 6-8 бластомеров.

· Оценка качества зародышей под микроскопом

· Трансвагинальный перенос 2-3 зародышей в матку.

o Остальных зародышей консервируют в жидком азоте.

Вероятность наступления беременности не более чем в 30% на одну попытку

Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида. (ИКСИ-метод)

· Показание: мужское бесплодие (олигоспермия, азооспермия – полное отсутствие эякулята и др.).

· Впервые беременность после ИКСИ получена в 1992 году в Бельгии.

· До этого использовалась донорская сперма.

· При отсутствие эякулята производят пункцию:

o Придатка

· Биоптат помещают в культуральную среду.

· Выбирают 1 нормальный, подвижный сперматозоид.

Оборудование.

· Инвертированный микроскоп на антивибрационном столе

· Два микроманипулятора

· Стеклянные микроинструменты:

o Присоска для яйцеклетки

o Микроигла для сперматозоида.

Этапы.

· Иммобилизация сперматозоида – перетирание хвоста микроиглой о дно чашки.

· Засасывание сперматозоида, первым в пипетку заходит хвост.

· Ориентация и закрепление ооцита на присоске - полярное тельце на 12 или 6 часов (под ним метафизарная пластинка).

· Прокол ооцита на 3 часа – наименьшее повреждение генетического материала (метафизарной пластины)

Донация ооцитов.

Показания: Отсутствие яичников или нефункционирующие яичники.

· Оплодотворяется донорская яйцеклетка по программе ЭКО, зародыш переносится в матку

· Дети генетически чужеродные для родивших их матерей.

· Перед пересадкой зародыша проводятся заместительная гормонотерапия, т.к. у женщины без яичников происходит уменьшение размеров матки и атрофия эндометрия.

· В течение 2-4 месяцев назначаются препараты эстрогенов и прогестерона согласно фазам менструального цикла.

Гаструляция (лат. gaster – желудок).

Процессы размножения, перемещения и дифференцировки клеток, в результате которых образуются зародышевые листки (эктодерма, мезодерма, энтодерма). Зародыш становится многослойным.

Способы гаструляции:

· Инвагинация (ланцетник).

· Эпиболия (амфибии).

· Иммиграция (птицы, млекопитающие).

· Деламинация (высшие позвоночные).

Похожая информация.